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细胞前处理
文章来源:江苏力生生物科技有限公司   添加时间:2015/8/1 10:33:01 点击率:2232

根据收集细胞数量,培养细胞的前处理:将培养细胞消化,1000~1500转/分钟离心10分钟,弃上清,留下层细胞,每管加0.3~0.5ml生理盐水或匀浆介质制备成106/cm3细胞悬液即106/ml,再进行破碎。

破碎细胞的方法有三种:①、用匀浆器匀浆。②、用超声粉碎器粉碎。③、反复冻溶3次(第③种方法有时会影响酶活力)。制备好的细胞悬液一般不需要离心。细胞数量较大可以适当加大匀浆介质量。裂解液考虑到成分可能干扰反应,所以不推荐使用,或者使用相对温和的裂解液Triton X-100.建议采用物理方法破碎细胞

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